Academic Journal
CLONING AND EXPRESSION OF A LIPASE GENE FROM PSEUDOMONAS AERUGINOSA INTO E.coli.
| Title: | CLONING AND EXPRESSION OF A LIPASE GENE FROM PSEUDOMONAS AERUGINOSA INTO E.coli. |
|---|---|
| Authors: | Auda, J. M., Khalifa, M. I. |
| Source: | Iraqi Journal of Agricultural Sciences; 2019, Vol. 50 Issue 3, p768-775, 8p |
| Subject Terms: | PSEUDOMONAS aeruginosa infections, PSEUDOMONAS aeruginosa, LIPASES, GENE expression, COCONUT, RIBOSOMAL RNA, DNA |
| Alternate Title: | E.coli في Pseudomonas aeruginosa الكلونة و التعبير لجين اللايبيز من بكتريا (Arabic) |
| Abstract (English): | Fifteen local isolates of Pseudomonas were obtained from several sources such as soil, water and some high-fat foods (Meat, olives, coconuts, etc.). The ability of isolates to produce lipase was measured by the size of clear zone on Tween 20 solid medium and by measuring the enzymatic activity and specific activity. Isolate M3 (as named in this study) was found to be the most efficient for the production of the lipase with enzymatic activity reached 56.6 U/ml and specific activity of 305.94 U/mg. This isolate was identified through genetic analysis of the 16S rRNA gene. and it was shown that the isolate M3 belongs to Pseudomonas aeruginosa with 99% similarity. The DNA of isolate M3 was extracted and lipase gene was amplified through PCR technique, then purified and cloned into E.coli DH5α cells first using pTG19-T plasmid, and expressed in E.coli Bl21 with expression vector pet-28a. The activity of lipase from transformed E.coli Bl21 was 196.6 U/ml and the specific activity 618.2 U/mg. [ABSTRACT FROM AUTHOR] |
| Abstract (Arabic): | تم الحصول على 15 عزلة محلية من بكتريا الدهنية )لحوم، ثمار الزيتون، ثمار جوز الهند وغيرها(. اختبرت قابلية العزلات على انتاج اللايبيز بطريقة الاطباق الصلبة بالإضافة الى قياس الفعالية الانزيمية والفعالية النوعية. أعطت العزلة Tween وملاحظة الهالة المتكونة باستعمال وسط 20 في هذه الد ا رسة اعلى فعالية لا نزيم اللايبيز والتي بلغت 56.6 وحدة/مل وفعالية نوعية 305.94 M التي رمز لها 3 تعود M 16 وقد بينت النتائج ان العزلة 3 S rRNA وحدة/ملغم. اخضعت العزلة المذكورة الى التشخيص الجيني بوساطة جين وتم تضخيم جين M وبنسبة تطابق بلغت 99 %. استخلص الحامض النووي من العزلة 3 Pseudomonas aeruginosa الى E.coli اللايبيز بتقنية تفعال البلمرة المتسلسل وباستعمال بوادئ صممت لهذا الغرض ثم تمت تنقيته وكلونته الى خلايا باستعمال الناقل E.coli Bl وثم كلونته والتعبير عنه في خلايا 21 pTG19-T باستعمال الناقل البلازميدي DH5α المكولنه 196.6 وحدة/مل والفعالية النوعية E.coli Bl بلغت الفعالية الانزيمية للايبيز من العزلة 21 .pet-28a التعبيري 618.2 وحدة/ملغم. [ABSTRACT FROM AUTHOR] |
| Copyright of Iraqi Journal of Agricultural Sciences is the property of Republic of Iraq Ministry of Higher Education & Scientific Research (MOHESR) and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.) | |
| ISSN: | 00750530 |
| Database: | Complementary Index |
Availability